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从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA

发布时间:2014-2-22 12:29:33      浏览次数:

从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA

产品在线:http://www.jianlun.com/Product/8051642613.html

1.数分钟内快速纯化得到高品质总RNA

2.即用型RNA在各种下游应用中表现良好

3.少量起始样本,RNA产量稳定

4.无需酚/ 氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无氯化锂或者乙醇沉淀步骤

RNeasy Mini Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA,硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效的破碎组织。可在QIAcube全自动核酸纯化仪上应用RNeasy Mini Kit实现RNA纯化自动化。处理更小或更大的样本,可使用RNeasy Micro Kit(离心柱结合能力为45 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg RNA)。

详细信息:

性能

RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本,或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA。

RNeasy Mini Kit纯化得到的总RNA产量

样本来源

起始材料

平均产量(µg

动物细胞
LMH
HeLa
COS-7
淋巴细胞(未受激)


1 x 106
1 x 106
1 x 106
1 x 106


12
15
35
0.5

小鼠组织



10 mg
10 mg
10 mg


40
10
35

真菌细胞
S. cerevisiae


1 x 107


25


原理

RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA,并且DNA残留水平达到最低。

操作流程

RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜。RNA结合到膜上(最多可结合100 µg),污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用,可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理,去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。


应用

使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris­·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:

1.Northern印迹、点印迹和狭缝印迹

2.终点式RT-PCR

3.定量real-time RT-PCR

4.芯片分析

5.Poly A+ RNA筛选

技术参数:

特点

参数

Applications

PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray

Elution volume

30–100 µl

Format

Spin column

Main sample type

Tissue, cells

Processing

Manual (centrifugation)

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

Total RNA

Sample amount

0.5–30 mg

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes

Yield

Varies