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纯化基因组DNA、线粒体DNA、细菌、寄生虫或病毒DNA

发布时间:2014-2-22 12:27:03      浏览次数:

1.快速纯化高品质,即用型DNA

2.重复性好,产量高

3.彻底去除污染物和抑制剂

QIAamp DNA Mini Kit使用硅胶膜技术从组织、拭子、CSF、血液、体液或尿液细胞中纯化核酸。组织用酶裂解,离心柱分离过程无需机械匀浆操作,手动操作时间仅为20分钟。QIAamp DNA Mini Kit可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动纯化DNA。

详细信息:

性能

QIAamp DNA Mini Kit可纯化长达50 kb的DNA片段。这个长度的DNA可完全降解且有最高的扩增效率。获得的核酸或DNA的量取决于样本来源(见表)。

QIAamp样本制备技术是完全经过验证的,纯化所得核酸可用于任何分子实验或其他下游应用,而无侵犯专利的风险。

QIAamp DNA Mini Kit的产量

样品

用量

总核酸的量(µg*

DNA 的量(µg

血液

200 µl

4–12

4–12

白膜层

200 µl

25–50

25–50

细胞

106

20–30

15–20

肝脏

25 mg

60–115

10–30

大脑

25 mg

35–60

15–30

25 mg

25–45

5–10

心脏

25 mg

15–40

5–10

肾脏

25 mg

40–85

15–30

脾脏

10 mg

25–45

5–30

* 核酸未经RNase处理 。
 核酸经RNase处理。总核酸的量(µg)*

 

 

 

原理

QIAamp DNA Mini Kit采用快速离心柱或真空操作,简化了从人类组织样本中纯化DNA的过程。无需苯酚-氯仿抽提。DNA特异性结合到QIAamp硅胶膜上,污染物流走。PCR抑制剂,如:二价阳离子和蛋白,可通过两步有效的洗涤被去除,结合在离心柱上的纯DNA可用水或试剂盒中的缓冲液洗脱。QIAamp DNA技术从人组织样本中纯化得到的基因组、线粒体、细菌、寄生虫或病毒DNA,可用于PCR和印迹实验中。 

操作流程

试剂盒含有优化的缓冲液,能有效裂解样本,可稳定核酸,并促进DNA选择性结合到QIAamp硅胶膜上。将乙醇加入到裂解物中,并上样到QIAamp离心柱上。洗涤缓冲液用于去除杂质,高纯的即用型DNA可用水或低盐缓冲液洗脱。

组织用酶裂解,无需机械匀质化操作,方便的离心柱过程只需20分钟的手工操作时间(裂解时间取决于样品来源)。样品可用离心处理,或已处理过的血液或其他体液可用QIAvac 24 Plus或QIAvac 6S真空底座处理。此外,严密的裂解过程使得QIAamp DNA Mini Kit非常适合于从细菌或寄生物中纯化基因组DNA。在QIAcube全自动核酸纯化仪上纯化基因组DNA用以减少手动操作时间。

真空处理

可用真空装置替代离心机处理血液或体液,可更快更方便地进行DNA纯化。QIAamp Mini离心柱可在QIAvac 24 Plus真空底座上配合VacValves和VacConnectors使用。在样本流速显著不同时,需使用VacValves以确保一致的真空条件。一次性的VacConnectors用于避免交叉污染。使用VacConnectors,也可使QIAamp离心柱操作在带有QIAvac Luer Adapters的QIAvac 6S上进行。 

应用

QIAamp DNA Mini Kit非常适合于从常规人组织样本中纯化DNA,包括:肌肉、肝脏、心脏、大脑、骨髓和其他组织、拭子(口腔、眼睛、鼻子、咽喉和其他)、CSF、血液、体液和尿液细胞。DNA可在20分钟内从多达25 mg的组织或200 µl的液体中纯化,洗脱体积50–200 µl。

技术参数:

特点

参数

Applications

PCR, Southern blotting

Elution volume

50–200 µl

Format

Spin column

Main sample type

Whole blood, tissue, cells

Processing

Manual (centrifugation or vacuum)

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

Genomic DNA, mitochondrial DNA, bacterial DNA, parasite DNA, viral DNA

Sample amount

200 µl/25 mg/5 x 10e6

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes

Yield

4–12 µg